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簡要描述:TAKARA RR047A 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 200次TAKARA 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑-常備現(xiàn)貨
品牌 | TaKaRa | 貨號 | RR047A |
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規(guī)格 | 200次 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
TAKARA RR047A 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
我們北京云肽生物科技有限公司作為 TAKARA 公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供,正規(guī)進口,保證原裝正品,貨期穩(wěn)定的服務標準。
Takara Bio 中國有兩家公司——寶生物工程(大連)有限公司和寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京有限公司。寶生物工程(大連)有限公司是 Takara Bio Inc.在中國的生產(chǎn)基地,寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京)有限公司負責 Takara Bio Inc.旗下所有品牌在中國市場的宣傳及銷售。
寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京)有限公司成立于 2004 年 1 月,公司主要銷售生物工程研究用試劑和儀器(包括 Takara、Clontech、Cellartis 品牌),產(chǎn)品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白質(zhì)功能研究、二代測序、干細胞研究等產(chǎn)品及服務,并可提供客戶定制化服務。還開展以細胞治療為中心的生物工程領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)與服務,銷售細胞治療和基因治療相關(guān)產(chǎn)品。
TAKARA 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑-常備現(xiàn)貨
TAKARA RR047A 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 200次
TAKARA RR047A 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 200次,產(chǎn)品說明:
制品內(nèi)容 (Code No.: RR047A: 20 μl反應×100次量)
1. gDNA Eraser 100 μl
2. 5X gDNA Eraser Buffer*1
200 μl
3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
4. 5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)*3 400 μl
5. RT Primer Mix*4 400 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml×2
7. EASY Dilution (for Real Time PCR)*5 1 ml
*1 5X gDNA Eraser Buffer在反轉(zhuǎn)錄反應前使用,請務必進行基因組DNA的除去反應。
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 含有dNTP Mixture。
*4 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*5 制作標準曲線時梯度稀釋cDNA或RNA標準品的稀釋液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀釋時,由于受Microtube吸附作用等的影響,往往不能準確地進行稀釋,導致實驗結(jié)果精度降低。使用本制品時,即使稀釋至低濃度也能夠進行準確地稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準確定量的標準曲線。本制品不影響反轉(zhuǎn)錄和PCR反應,用其稀釋后的樣品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) (Code No. 9160/9160Q) 也可以單獨購買。
注意:EASY Dilution (for Real Time PCR) 請與本公司Real Time PCR試劑組合使用,對于其他公司的同類制品的適用性本公司尚未進行確認。
制品說明
為了準確地進行基因表達量分析,必須滿足只有cDNA作為模板檢出的先決條件,但Total RNA中常?;煊谢蚪MDNA,并可以直接作為PCR反應的模板進行擴增,因此會造成解析結(jié)果不準確。為了避免這種情況發(fā)生,通常將檢測用引物設(shè)計在內(nèi)含子前后的外顯子上,使基因組DNA得不到擴增。但是,此方法不適合具有單個外顯子的基因或兩個外顯子之間所跨的內(nèi)含子過小的基因,同時當基因組上有偽基因存在時、或設(shè)計引物對基因組有非特異性擴增時、以及基因信息沒被wan全解析的生物種等也同樣不適合于本方法。在這種情況下,我們常常需要對Total RNA樣品進行DNase I處理,以除去殘存的基因組DNA。而DNase I處理通常要進行復雜的純化操作,同時會造成RNA的降解和損失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進行Real Time RT-PCR反應的專用反轉(zhuǎn)錄試劑。Kit中使用了具有較強DNA分解活性的gDNA Eraser,通過42℃,2 min即可除去基因組DNA。同時由于反轉(zhuǎn)錄試劑中含有抑制DNA分解酶活性的組分,經(jīng)過gDNA Eraser處理后的樣品可以直接進行15 min的反轉(zhuǎn)錄反應合成cDNA,因此,20 min內(nèi)即可迅速完成從基因組DNA去除到cDNA合成的全過程。
使用本制品合成的cDNA適用于嵌合法和探針法qPCR分析,可以根據(jù)實驗目的,選擇與TB Green® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)*、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 組合使用。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)產(chǎn)品的名稱從2017年12月下旬開始,將逐步變更為「TB Green系列」。產(chǎn)品Code、性能和原有產(chǎn)品相比沒有變化,請繼續(xù)放心使用。
產(chǎn)品名稱將隨新lot的產(chǎn)品逐步變更,產(chǎn)品網(wǎng)頁或操作說明書可能會先于產(chǎn)品標簽變更,望知悉!
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試劑盒特長
1. 含有去除基因組DNA的gDNA Eraser,只需2 min即可除去基因組DNA。
2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反應用模板cDNA,是進行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
3. 反轉(zhuǎn)錄引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix,可以均勻合成樣品中的各種cDNA。
4. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探針qPCR分析法各自適合的反應體系,可以根據(jù)分析方法選擇體系。
TB Green qPCR分析法和探針qPCR分析法區(qū)別如下:
(1) 反轉(zhuǎn)錄反應中RT Primer Mix的用量。
(2) 反轉(zhuǎn)錄反應中總RNA的用量。
5. Real Time RT PCR定量需要建立標準曲線,建立標準曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時,由于模板濃度低不穩(wěn)定,因而會縮小曲線范圍,結(jié)果準確度降低。本制品中附加了標準曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR) ,將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進行準確稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準確定量的標準曲線。
注意事項
1.使用本制品合成的cDNA與TB Green關(guān)聯(lián)制品組合使用時,建議使用:
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
以上制品與本制品組合使用,可以得到可信度高的結(jié)果。
本制品與TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 組合使用時,有時反應性能不好,不推薦使用。
2. 當同時需要進行數(shù)次反應時,應先配制各種試劑的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分裝到每個反應管中。這樣可使所取的試劑體積更準確,減少試劑損失,避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或?qū)嶒炛g產(chǎn)生的誤差。
3. gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地離心收集到反應管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取時應慢慢吸取。同時,要使用精確、量程適合的移液槍,并且不要使Tip插入液面過深,否則會因Tip壁粘著造成損失,而使酶量不足。
4. 5X gDNA Eraser Buffer和5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)在使用前需Vortex振蕩混勻,輕輕離心后使用。
5. 分裝試劑時務必使用新的槍頭 (Tip),以防止樣品間污染。
TAKARA 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品訂購信息:
TAKARA RR047A 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 200次
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